在喧闹的白天，你可能看不到多少老鼠，因为鼠类大多是夜行性动物。白天，它藏匿于洞中静养生息，黄昏时分才纷纷出洞开始活动。田野上的鼠奔腾、跳跃，四处匿食，家居的鼠则在吃足喝饱之后互相嬉戏、逗闹。累了回洞休息，下半夜继续活动，至黎明前又返回巢穴。但也有少数鼠种，如北方的大沙鼠、长爪鼠和黄鼠等是昼夜性，白天出来摄取食物，夜间藏在洞内。一般活动范围可离洞几十米到几百米，甚至离洞达1000米左右。
鼠类种族不同，昼夜活动的习性也不一样。大、小家鼠是白天黑夜都活动，但夜间活动频繁。夜深人静之后，它们不在那么胆怯和紧张，有时甚至是大大方方直奔食物而去，肆无忌惮上蹿下跳，无所不为。但它并不因为黑夜而失去警惕，相反，能迅速察觉周围的环境的任何改变，以减少对自己的危害，一旦有微小的响动，马上逃之夭夭。五趾跳鼠是草原上夜间活动最主要的鼠类，它凭着嗅觉能将草籽等一一刨吃。俗称“寒号虫”的复齿鼯鼠，白天隐匿巢中睡觉，清晨和傍晚活动频繁。它爬攀动作缓慢，习惯在固定地方排泄粪便。
如果你在夜深人静时起来观察老鼠的活动，会发现活动剧烈，步态敏捷，近乎调皮捣蛋的大多是幼鼠或青年鼠。而步态迟缓，以吃喝为主，或以观看为乐的大多数是年龄稍大的鼠。幼鼠在出生后2个月以内，活动范围只是在窝内，跟母鼠作一些短距离的活动。3个月以后，它开始寻情配偶，活动力急剧加强；到9个月龄时达到最高峰。以后逐渐降低，如果能活到18个月，那它的活动能力就显得老态龙钟了。有人估算，一只雄鼠一生跑路约3200~3400公里，雌鼠可跑8000公里，寿命长的甚至能跑1万公里。家鼠善于游泳，大家鼠在35℃水中能漂浮游60-72小，潜水捕鱼可闭气30秒，在平静的水面亦可游800-1000米，游速为1.4公里/小时。
老鼠每年有两个活动高峰，一个是春季，一个是在秋季。大家鼠和小家鼠一年四季都在活动，但春天庄稼长起来，一部分家鼠就离开住宅奔向田野，在地里打洞坐窝繁殖后代。秋季后地净场光，无食可匿，又面临冬季的到来，就又纷纷迁回住宅。
